Análise dos níveis séricos de scd40l, scd40 e scd62p em crianças e adolescentes com anemia falciforme e alteração do exame de doppler transcraniano

Abstract

Introdução: a anemia falciforme (AF) é a hemoglobinopatia hereditária de maior prevalência no Brasil, determinada pela homozigose da hemoglobina “S”, sendo resultante de uma mutação no gene da beta globina. O Acidente Vascular Cerebral (AVC) é uma complicação grave e catastrófica da AF, sendo uma das principais causas de morbimortalidade em crianças e adultos jovens. Pacientes com AF que apresentam risco elevado para AVC são monitorados por meio do Doppler transcraniano (DTC), sendo esse método usado para predizer risco para AVC. As plaquetas possuem a capacidade de promover eventos vaso-oclusivos e também de regular a resposta imune através de mediadores inflamatórios. As plaquetas ativadas expressam grandes quantidades do ligante CD40 (CD40L) e de CD62P (P-selectina). Essas moléculas têm sido consideradas como marcadores de ativação plaquetária na AF, no entanto não está descrito na literatura o potencial dessas moléculas como biomarcadores preditivos de risco para AVC em pacientes pediátricos com AF. Objetivo: avaliar os níveis séricos de sCD40L, sCD40 e sCD62P em crianças e adolescentes com anemia falciforme e alteração do exame de DTC. Métodos: estudo translacional, de corte transversal e grupo de comparação interno, desenvolvido no Laboratório de Pesquisa Translacional do Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira (IMIP). Foram incluídos 48 pacientes com AF com idade de 2 a 16 anos, acompanhados no Centro de Hematologia e Hemoterapia de Alagoas (HEMOAL, Brasil). O grupo de controles saudáveis foi constituído por 26 crianças e adolescentes saudáveis (de 2 a 13 anos) hospitalizados para realização de cirurgias eletivas de pequeno porte no Hospital Universitário Professor Alberto Antunes da Universidade Federal de Alagoas (UFAL, Brasil). Os pacientes foram divididos em 03 grupos, de acordo com as características clínicas da doença: Grupo 1: AF com DTC normal e sem AVC (n=24); Grupo 2: AF com DTC anormal e sem AVC (n=16); Grupo 3: AF com AVC (n=8). A dosagem de sCD40 e sCD40L livre no plasma foi realizada por enzyme immunosorbent assay (ELISA) e a de sCD62P por citometria de fluxo. Para testar as diferenças entre os grupos utilizaram-se os testes t e de Mann-Whitney para análise de médias e medianas, respectivamente, enquanto que para a correlação entre as variáveis foi usado o coeficiente de correlação de Sperman. Foram considerados significativos valores de p<0.05. Para análise estatística foi utilizado o GraphPadPrism v6.0. Resultados: os níveis de sCD40L foram significativamente mais elevados nos grupos G1, G2 e G3, quando comparado aos controles (p=0,0001; p<0,0002 e p=0,008, respectivamente). Entre os pacientes com AF evidenciou-se níveis mais elevados de sCD40L no grupo G3 (median =1.330 pg/ml; range= 872-2550), com relação ao grupo G2 (mediana=1.003; p =0,03). Na análise de sCD40, não houve diferença significativa entre os quatro grupos. Na análise do sCD62P, os pacientes do G3 apresentaram níveis elevados, quando comparado ao G1 (p=0,0001); G2 (p= 0,03) e controles (p=0,01), e G2 também apresentou níveis elevados, quando comparados com os do G1 (p=0,04). Os pacientes do G1 apresentaram índice mais elevado na relação sCD40L/sCD62P, quando comparado ao do grupo G2 (p=0,003) e aos controles (p<0,0001). Os índices de sCD40L/sCD40 foram 7,1; 6,1 e 7,7 vezes mais elevados nos pacientes dos grupos G1, G2 e G3, respectivamente, quando comparado aos controles (p<0,0001, p<0,008 e p=0,002, respectivamente), porém não houve diferença significativa entre os G1, G2 e G3. Não houve correlação nos níveis de sCD40L vs sCD62P, sCD40 vs sCD40L, e de sCD40 vs sCD62P. Conclusão: a combinação da anormalidade do DTC associado ao aumento dos níveis de sCD40L e sCD62P ou diminuição da relação sCD40L/sCD62P podem contribuir para uma melhor avaliação do risco para AVC em pacientes pediátricos e adolescentes com AF