Avaliação imunológica de gestantes rhd negativo: estudo exploratório

Abstract

Introdução: a aloimunização eritrocitária na gestação, caracteriza-se por uma resposta inflamatória materna com produção de anticorpos IgM e IgG contra antígenos eritrocitários fetais. Todavia, faltam estudos que avaliem o perfil de citocinas inflamatórias e quimiocinas em gestantes, de acordo com o RhD materno e a presença de aloimunização eritrocitária. Objetivo: avaliar a resposta imune e os parâmetros hematológicos eritrocitários em gestantes RhD negativo. Métodos: foi realizado um estudo do tipo analítico, exploratório e translacional no Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira (IMIP), composto por 82 gestantes (43 RhD negativo, 16 RhD negativo aloimunizadas e 23 RhD positivo) e 30 controles saudáveis (mulheres não gestantes), com idade entre 18 a 45 anos. As análises laboratoriais foram: dosagem de antigamaglobulina indireta e das concentrações de citocinas (IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL- 8, IL-10, IL-17a, TNF-α e IFN-γ) e quimiocinas (MCP1, MIG, RANTES e IP10) do sobrenadante de cultura celular estimulada com fitohemaglutinina; imunofenotipagem de linfócitos T, TCD4+, TCD8+, B e NK por citometria de fluxo e apenas nas gestantes aloimunizadas, a genotipagem RhD fetal no plasma materno por PCR em tempo real, utilizando o método TaqMan. Para análise estatística foi realizado o teste de Mann Whitney e correlação de Spearman r, utilizando o programa GraphPad® Prism 6. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética e Pesquisa do IMIP. Resultados: nas gestantes aloimunizadas, verificou-se elevados níveis de IL12 e MCP1 e baixa concentração de IL1β e RANTES quando comparados aos controles saudáveis. Nessas gestantes foi encontrado uma correlação positiva entre as citocinas IL-8 vs IL-10 (r=0.51, p=0.04), IL-8 vs IL-6 (r=0.59; p=0.01), IL-1β vs IL-6 (r=0.57, p=0.02), IL-1β vs IL-10 (r=0.57, p=0.02), IL-6 vs IL-10 (r=0.79, p=0,004), IL12 vs IL12 (r=0.50, p=0.04); correlação positiva entre as quimiocinas MIG vs RANTES (r=0.58, p=0.02), MIG vs MCP1 (r=0.50, p=0.04) and MIG vs IP10 (r=0.55, p=0.02). Das 16 gestantes aloimunizadas, 10 apresentaram anticorpos anti-D e, anti-D e -C. Na genotipagem RhD fetal, 74% dos fetos foram RHD positivo. Não houve diferença estatisticamente significativa entre as medianas dos valores de hemácias, hematócritos, hemoglobina e plaquetas entre as gestantes de baixo risco no segundo e terceiro trimestres. As gestantes apresentaram valores relativos e absolutos diminuídos de células B e NK quando comparados aos controles saudáveis e elevado percentual de linfócitos TCD4+ e TCD8+ circulantes. Conclusões: existem alterações no perfil de linfócitos circulantes nas gestantes. As gestantes aloimunizadas apresentam uma resposta inflamatória do tipo Th1 e o aumento de produção de quimiocinas que promovem a migração de linfócitos e monócitos para decídua. Não foram observadas mudanças nos parâmetros imunológicos e hematológicos eritrocitários entre gestantes do segundo e terceiro trimestres