Avaliação da expressão dos mediadores solúveis CCL18, CCL22, PD-1, PD-L1, PD-L2, Fas e FasL em pacientes hospitalizados com COVID-19 aguda grave

Abstract

Introdução: Estudos demonstram haver uma relação importante entre a severidade da COVID-19 e os mediadores imunes. Sugere-se que a lesão tecidual, principalmente, nos pulmões ocorra por uma desregulação entre citocinas pró-inflamatórias e anti-inflamatórias. Diversos mediadores inflamatórios que regulam o sistema imune inato e adaptativo (CCL18 e CCL22) e outros que fazem parte do checkpoint imunológico (PD-1, PD-L1, PD-L2, Fas e FasL) têm sido investigados, principalmente em pacientes com forma grave da doença. Objetivo: Avaliar a expressão dos mediadores solúveis CCL18, CCL22, PD-1, PD-L1, PD-L2, Fas e FasL em pacientes hospitalizados com COVID-19 aguda grave. Métodos: Foi realizado um estudo transversal restrospectivo e translacional em Hospital Provisório de Referência à COVID-19 Unidade Boa Viagem e no Laboratório de Pesquisa Translacional do Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira (IMIP), Recife-PE, Brasil, de janeiro a agosto de 2021, durante a segunda onda da COVID-19. Os pacientes tinham  18 anos de idade, de ambos os sexos e diagnóstico de infecção por SARS-CoV-2 confirmado por um teste positivo de reação de transcriptase reversa seguida de reação em cadeia da polimerase. No primeiro artigo, foram avaliados 286 pacientes com diagnóstico de COVID-19 distribuídos em dois grupos: 45 internados em enfermaria e 241 em Unidade de Terapia Intensiva (UTI), nos quais foram dosados os níveis solúveis de CCL18 e CCL22. Desses 286 pacientes, para o segundo artigo, foram excluídos 45 pacientes internados em enfermaria e um paciente internado em UTI que não possuia informação sobre o desfecho (óbito ou sobrevivente). Foram analisados 240 pacientes, internados em UTI, que foram divididos em dois grupos: 100 óbitos e 140 sobreviventes, nos quais foram dosados os níveis solúveis de PD-1, PD-L1, PD-L2, Fas e FasL. Todas as dosagens foram determinadas por ensaio de imunoabsorção enzimática. As variáveis categóricas foram expressas em números absolutos e relativos. As variáveis contínuas foram apresentadas na mediana e no intervalo interquartil (IQ) por apresentarem distribuição não normal. O teste exato de Fischer foi usado para comparar variáveis categóricas. De acordo com o teste de normalidade de Shapiro-Wilk, os níveis solúveis de CCL18, CCL22, PD-1, PD-L1, PD-L2, Fas e FasL não apresentaram distribuição normal. Posteriormente, testes não paramétricos foram usados para comparar dois grupos (teste de Mann-Whitney). Foi utilizado o teste de correlação de Spearman. Os níveis de correlação foram classificados de acordo com o valor r de Pearson. A análise dos dados foi realizada pelo software GraphPad Prism v9.0 (GraphPad Software, San Diego, CA). Para todas as análises, valores de p<0,05 foram considerados significativos. O comitê de ética institucional do IMIP (CAAE nº 39241220.5.0000.5201) aprovou o protocolo do estudo. Resultados: Os níveis solúveis de CCL18 foram mais altos nos pacientes internados em UTI quando comparados com o grupo de pacientes em enfermaria (p=0.0034). Entre os pacientes internados em UTI, os que morreram apresentaram níveis solúveis de CCL18 mais altos quando comparados com os que sobreviveram (p<0.0001). Os níveis solúveis de PD-L2 e de Fas foram elevados no grupo que foi a óbito em comparação ao grupo que sobreviveu (p=0.0028 e p<0.0001, respectivamente). Conclusões: Níveis aumentados de CCL18 estão associados à gravidade e à mortalidade por COVID-19, e de PD-L2 e de Fas estão associados à mortalidade por COVID-19. Sugere-se que níveis aumentados desses mediadores imunes possam ser utilizados como potencial biomarcador de gravidade e de mortalidade (CCL18) e de mortalidade (PD-L2 e Fas) e que pesquisas futuras envolvendo COVID-19 e mediadores imunes possam se concentrar no desenvolvimento de abordagens terapêuticas direcionadas a esses mediadores estudados.